纸层析法(paPer ChromaograPhy)通常用于蛋白质的氨基酸成分定性和定量,1944年A.亅.p.马丁第一次用纸层析法分析氨基酸,得到很好的分离效果。到现在为止,纸层析法已经成为是性或定量测定多肽,核酸碱基,糖,有机酸,维生素,抗生素等物质的一种最简单易行的分离分析工具。
层析用于分析简单的混合物时可做单向层析。对于复杂的混合物,可做双向层析。一具原理是以滤纸为惰性支持物的分配层析,层析溶剂由有机溶剂和水组成。滤低纤维上的羟基具有亲水性,吸附一层水依为固定相,有机溶剂为流动相。当有机相流经固定相时,由于分配系数不同,结果物质在两相间不断分配而得到分离
。样品经展开后某一物质在纸层析谱上的位置常用比移值(rate of folW,R.)米表示,R.=原点至层析斑点中心跑巨离/原点至溶剂前沿的距离=X/Y
在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与被测物的结构,性质,溶剂系统,层析滤纸的质量和层析温度等因素有关,本实验利用单向纸层析法分离氨基酸。…