怎么在NCBI里面找到目的基因的CDS

如题所述

怎么在NCBI里面找到目的基因的CDS
找几个近源的物种的该基因clustal,找出几个长度大于20的保守区,在这几个保守区域拉几条引物,放到primer5里评一下分,找一对分数高的引物,产物长度200-1000bp都可以,扩去就行了。如果找不到完全一致的引物,就在不一样的那个碱基上设计成简并的。
如果知道要找的基因的名字是可以很快的找到要找的序列,在基因名称检索界面输入就好。 因为提交NCBI上的基因组都有预测CDS的,上面都标出每个CDS的可能功能及相应蛋白或酶的名字 如果不知道基因名字,可以通过做比对来判断,可以尝试一下用BIOED
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第1个回答  2020-12-20
怎么在NCBI里面找到目的基因的CDS
提取细胞总RNA然后用试剂盒反转录成cDNA,用cDNA作为模板扩增基因的CDS区,然后想要转染进细胞中。比如MYOD1基因,首先在NCBI找到它的mRNA序列,然后找到它的CDS序列,全部复制下来,在primer 5.0 中。正向引物直接从CDS的第一个核酸开始(比如18bp),反向引物从CDS最后一个核酸开始,向前选择序列(比如17bp),调节2个引物的长度(不一定要一致),尽量避免错配,二聚体,产生错的产物即可。最后在引物的5‘端添加酶切位点以及保护碱基。
第2个回答  2020-12-18

使用NCBI查找基因序列教程

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