二、原理
纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分
配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相
水是固定相,
配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相,
展层用的有机溶剂是流动相
在层析时,
有机溶剂是流动相。
展层用的有机溶剂是流动相。在层析时,
将样品点在距滤纸一端约2~
的某一处,
将样品点在距滤纸一端约
~3cm的某一处,
的某一处
该点称为原点;
该点称为原点;然后在密闭容器中层析溶剂
沿滤纸的一个方向进行展层,
沿滤纸的一个方向进行展层,这样混合氨基
酸在两相中不断分配。由于
分配系数(
酸在两相中不断分配。由于分配系数(Kd)
不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上。
不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上。
物质被分离后在纸层析图谱上的位置,
物质被分离后在纸层析图谱上的位置,可用
比移值(
来表示。
比移值(Rf)来表示。
所谓R
是指在纸层析中,
所谓
f,是指在纸层析中,从原点至
氨基酸停留点(又称为层析点)中心的距离(
)
停留点(又称为层析点)中心的距离(X)与
原点至溶剂前沿的距离(
)的比值。
原点至溶剂前沿的距离(Y)的比值。如图
原点到层析点中心的距离
X
Rf
=
=
Y
原点到溶剂前沿的距离
在一定条件下(如温度、展层剂的组成、
在一定条件下(如温度、展层剂的组成、
层析纸质量等不变),某种物质的R
),某种物质的
层析纸质量等不变),某种物质的
f
值是常
因此可作为定性依据。
数,因此可作为定性依据。
由于氨基酸无色,
由于氨基酸无色,可利用
茚三酮反应使
氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析。
氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析。本
实验利用纸层析法分离氨基酸。
实验利用纸层析法分离氨基酸。
温馨提示:内容为网友见解,仅供参考
相似回答