高效液相色谱系统适应性试验

Question

检测样品是地塞米松磷酸钠含量，有对照品地塞米松和地塞米松磷酸钠，那我系统适应性试验应该怎么进针呢？我的想法是：
地塞米松对照品对A进5针，然后地塞米松磷酸钠对照品对1，对2各进2针，样品双样双针，分离度计算：
分离度计算公式R=2（t2-t1）/(W1+W2)
其中，t1,w1分别为地塞米松对A5针保留时间和峰宽平均值，t2,w2分别为地塞米松磷酸钠对1 2针保留时间和峰宽平均值，请教一下各位我的做法对吗？谢谢！！！
请问各位我的做法对吗？

Answer 1

你的做法不够准确。 下面我说说我的看法
分离度是在一张色谱图中（也就是一次进样过程中）考察分离物质在色谱柱中的分离情况,常用分离度作为柱的总分离效能指标，也就是系统是否适用的指标之一。
把两个物质分别进样，再以此来计算分离度，我觉得你对分离度的概念理解得还不够深，这样的话就忽略了这两种物质的相互作用，不能准确的判断这个色谱系统能否将这两种物质分开。

另外，系统适应性试验还包括拖尾因子、理论塔板数两项。仅仅只做一项分离度是不够的。

Answer 2

是的，混合进样，还要看你的液相条件下的物质浓度，配制成液相条件下的浓度，混合进样。如是有关物质，地塞米松就配成限度浓度的样品溶液进行进样分析，考察其分离度，塔板理论数，峰的对称因子，还有色谱峰的重现性。即保留时间和面积的RSD值

Answer 3

高效液相色谱系统适应性试验 一共需要检查四项：1）H检验 2）分离度R 3）RSD小于2.0%

3）有无拖尾 w/2d 在0.9到1.1之间