用薄层色谱法鉴别异黄酮时,一般展开剂用什么？

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摘 要 目的 探讨鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分的方法。方法 应用薄层色谱法鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分，黄酮采用ρ=3%AlCl3（乙醇）溶液显色，生物碱采用稀碘化铋钾试液显色。结果与结论 以薄层色谱鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分，不同于一般化学鉴别（试管法），其分离效果较好，专属性强，具有实际参考价值。 　　关键词 广金钱草；薄层色谱鉴别；黄酮；生物碱　　广金钱草是豆科植物广金钱草Desmodium styracifolium (Osb.)Merr. 的干燥地上部分，为较常用中药［1，2］。中国药典2000年版收载有“清热除湿，利尿通淋”的作用［1］。对广金钱草的鉴别，文献主要介绍性状鉴别、显微鉴别及一般的化学鉴别（试管法） ［1，3］。本文以薄层色谱法鉴别广金钱草中的黄酮和生物碱成分，报道如下。　　1 仪器及试剂　　1.1 仪器 　　20 cm×10 cm双槽展开缸。　　1.2 试剂 　　薄层层析硅胶G(化学纯)，GF254(化学纯)，青岛海洋化工厂产品。 层析氧化铝（碱性），100～200目，上海社园精细有限公司产品。羧甲基纤维素钠，上海化学试剂分装，黏度2%水溶液为300～800 mPa/s。其余试剂均为分析纯。　　2 供试品及对照药材　　2.1 广金钱草药材购自采芝林药店北京路分店，经广东药学院药用植物与生药学教研室鉴定为豆科广金钱草Desmodium styracifolium (Osb.)Merr.（中国药典2000年版一部）的全草。　　2.2 广金钱草对照药材由广东省药品检验所中药室提供。　　3 广金钱草黄酮薄层色谱鉴别［2］　　取广金钱草粉末1 g，置圆底瓶中，加甲醇20 mL，加热回流1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使溶解，滤过，滤液用醋酸乙酯提取2次，每次10 mL，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取广金钱草对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2000版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10 μL，分别点于同一以ρ=0.3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以ψ(醋酸乙酯∶甲酸∶水)=（8∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以ρ=3%AlCl3（乙醇）溶液［4,5］， 105 ℃加热约5 min，置紫外光灯（365 nm）下检视［6］，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图1。　　4 广金钱草生物碱薄层色谱鉴别　　取广金钱草粉末1 g，置圆底瓶中，加浓氨溶液5 mL［6］，密塞，摇匀，放置30 min，加氯仿50 mL，加热回流2 h，取出放冷，分取氯仿液，药渣再用氯仿适量洗涤，合并氯仿液，用无水硫酸钠脱水，置水浴上蒸至约1 mL，加于碱性氧化铝柱（5 g，直径15 mm）上，用ψ(氯仿∶无水乙醇)=（1∶1）混合溶液50 mL洗脱［6］，收集洗脱液，置水浴上蒸至约1 mL，作为供试品溶液。另取广金钱草对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2000版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各4 μL，分别点于同一以ρ=3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板上，以ψ(苯∶丙酮∶甲醇)=（8∶3∶0.5）为展开剂，另槽用等量的浓氨溶液预平衡15 min，展开，取出，晾干。置254 nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的暗斑点；喷以稀碘化铋钾试液［6,8］，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。